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液相色譜儀各個分支需要注意的事項
點擊次數：2193 更新時間：2020-10-12
液相色譜儀是一種分離與分析儀器，其特點是以液體作為流動相，固定相可以有多種形式，如紙、薄板和填充床等。在色譜儀發展的過程中，為了區分各種方法，根據固定相的形式產生了各自的命名，如：紙色譜、薄層色譜和柱液相色譜。
1、色譜儀氘燈：
色譜儀開始進樣前30分鐘開氘燈即可，節約燈的能量和使用時間。
2、流動相的使用和注意事項：
①所用流動相必須預先濾過和脫氣，流動相一般貯存于玻璃不銹鋼容器內。貯存容器一定要蓋嚴，防止溶劑揮發引起組成變化。磷酸鹽、乙酸鹽緩沖液很易長霉，應盡量新鮮配制使用，不要長期貯存。容器應定期清洗，特別是盛水、緩沖液和混合溶液的瓶子，以除去底部的雜質沉淀和可能生長的微生物。
②配制流動相用水需為純凈水或經超聲過濾后的純化水，流動相配制好后先用直徑為5cm，孔徑為0.45um的濾膜，通過沙芯過濾器的過濾，然后在超聲儀上超聲。
?、鄄坏脤⒀b流動相的容器直接放置與超聲儀內，需放與篩網上進行超聲。
3、六通閥的使用和維護注意事項：
?、贅悠啡芤哼M樣前必須用濾膜過濾，以減少微粒對進樣閥的磨損。
?、谵D動閥芯時不能太慢，更不能停留在中間位置，否則流動相受阻，使泵內壓力劇增，甚至超過泵的Zda壓力；再轉到進樣位時，過高的壓力將使柱頭損壞。
③為防止緩沖鹽和樣品殘留在進樣閥中，每次色譜儀分析結束后應沖洗進樣閥。通常可用水沖洗，或先用能溶解樣品的溶劑沖洗，再用水沖洗。
4、色譜柱柱壓升高的主要因素：
①泵的單向閥堵塞。
?、谏V柱的入口篩板堵塞。
?、畚鼮V頭堵塞。
?、躊EEK管接口處堵塞。
5、色譜柱柱壓不穩的因素：
?、?strong>液相色譜儀泵內有空氣。
?、诒妹芊鈮|損壞。
?、廴軇┲械臍馀荨?/div>
?、芟到y檢漏，找出漏點。
6、樣品峰保留時間漂移的主要因素：
?、偈覂葴囟茸兓^大。
?、诹鲃酉喑煞职l生變化。
?、凵V儀色譜柱未平衡好。
④色譜儀泵中有氣泡。
?、菰摿鲃酉嗍欠襁m宜此樣品的檢測。
7、基線漂移的主要因素：
?、僦鶞夭▌印?/div>
?、诹鲃酉嗖痪鶆?。
?、哿魍ǔ乇晃廴净蛴袣怏w。
?、苌V儀檢測器出口阻塞。
?、萘鲃酉嗯浔炔划敾蛄魉僮兓?。
⑥流動相污染、變質。
?、呤褂醚h溶劑。
8、色譜儀檢測器靈敏度不夠的主要因素：
?、贅悠愤M樣量不足。
?、诓ㄩL設置不正確。
?、蹤z測器池窗污染。
④檢測池中有氣泡。
?、蓦妷翰环€。
?、蘖鲃酉嗔魉俨缓线m。
9、色譜柱的使用和維護注意事項：
①避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動。柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內填料，因此在調節流速時應該緩慢進行，在閥進樣時閥的轉動不能過緩。
?、趹饾u改變溶劑的組成，特別是反相色譜中，不應直接從有機溶劑改變為全部是水，反之亦然。
③一般說來色譜儀色譜柱不能反沖，只有生產者指明該柱可以反沖時，才可以反沖除去留在柱頭的雜質。否則反沖會迅速降低柱效。
?、苓x擇使用適宜的流動相(尤其是pH)，以避免固定相被破壞。
?、荼苊鈱碗s的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內，需要對樣品進行預處理或者在色譜儀進樣器和色譜柱之間連接一保護柱。
⑥經常用強溶劑沖洗色譜柱，清除保留在柱內的雜質。
?、弑４嫔V柱時應將柱內充滿乙腈或甲醇，柱接頭要擰緊，防止溶劑揮發干燥。禁止將緩沖溶液留在柱內靜置至次日或更長時間。
?、嗌V柱使用過程中，如果壓力升高，一種可能是濾片被堵塞，這時應更換濾片或將其取出進行清洗；另一種可能是大分子進入柱內，使柱頭被污染；如果柱效降低或色譜峰變形，則可能柱頭出現塌陷，死體積增大。
?、嵋怨枘z為基質的填料，只能在pH2~9范圍內使用。色譜儀每次分析檢測完成后，*用洗脫能力強的洗脫液沖洗，例如ODS柱宜用甲醇沖洗至基線平衡。
10、色譜儀樣品：
液相色譜儀樣品必須用直徑為2.5cm，孔徑為0.45um的濾膜針式過濾。如有明確要求需用離心過濾的，經離心過濾后取上清液即可。
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